在實驗室裏做高效液相色譜（HPLC）分析，基線穩定是實驗能順利進行的基礎，數據準不準全看它。 基線要麽布滿毛刺，噪聲大得讓人頭疼；要麽就慢慢往上飄，或者一個勁兒往下掉。這些問題不僅讓數據重複性差，折騰半天結果也沒法用，依利科技提供實用的技術支持，幫著解決這些麻煩，為您整理常見基線問題處理方式。

​一、基線不穩定的表現​

基線噪聲大是容易發現的，好好的一條線，突然布滿小毛刺，這樣一來峰積分就沒法準確計算，儀器靈敏度也跟著下降，那些含量低的組分，很可能就檢測不出來了。​

基線漂移也很常見，就是基線慢慢上爬或下滑。它帶來麻煩的是，有時會將目標峰部分甚至全部掩蓋住，造成色譜峰麵積積分損失，嚴重影響定量準確性，甚至無法進行定量分析。​

還有比如泵運轉時的脈動帶來的基線周期性波動，對低濃度組分峰的檢測影響非常大，容易引起誤判，甚至直接將這樣的小色譜峰忽略掉。​

二、常見原因及解決方案​

1. 流動相問題​

流動相就像儀器的 “血液”，它出問題，基線馬上就有反應。流動相脫好不徹底，氣泡進入檢測器的檢測池，就會引基線上下跳動，因為氣泡在檢測池裏會幹擾光的透過和折射。配製流動相的溶劑的純度也要符合要求。如果溶劑純度低，裏麵的雜質隨流動相進入檢測係統，幹擾信號，讓基線變得雜亂。另外，配製好的緩衝鹽溶液放久了，可能會析出沉澱，pH 值發生變化，這些都會導致基線不穩。​

解決流動相的問題其實不難。首先脫氣要做好，實驗室常用超聲處理，條件允許的話用在線脫氣機更靠譜，能持續去除氣泡。其次，一定要用 HPLC 級溶劑，雜質少，能減少幹擾。倒溶劑時要小心，試劑瓶及時蓋好，避免汙染。緩衝鹽流動相好現配現用，配好後盡快使用，別放太久，防止析出沉澱或 pH 變化。​

2. 檢測器問題​

檢測器是接收信號的關鍵，它狀態不好，基線肯定受影響。氘燈、鎢燈用久了會老化，能量不足，發出的光不穩定，檢測器接收的信號就會波動，基線自然不穩。流通池也容易出問題，裏麵髒了或者有氣泡沒排淨，會影響光的傳播，導致信號異常，基線要麽有噪聲，要麽就漂移。​

處理檢測器問題，先檢查燈的能量。一般氘燈使用壽命在 1000-2000 小時，快到時間或者感覺能量明顯下降，就及時更換。流通池髒了，用甲醇或稀硝酸超聲清洗，把髒東西和氣泡清理掉，讓它保持潔淨。​

3. 泵或係統問題​

泵是推動流動相的動力，它出問題，整個係統都穩不了。泵的密封圈磨損了，可能會漏液，或者導致壓力波動，流動相流速不穩定，基線就會跟著晃。單向閥堵塞也很麻煩，會讓流速忽快忽慢，係統無法平穩運行，基線肯定不穩定。​

解決泵和係統的問題，定期維護是關鍵。發現泵密封圈磨損，趕緊更換，這是泵正常工作的基礎。單向閥堵塞了，用異丙醇浸泡 10 分鍾左右，再超聲清洗，通常能清除堵塞物，讓單向閥恢複正常。​

4. 色譜柱問題​

色譜柱是分離組分的核心，它狀態不佳也會導致基線問題。用久了，色譜柱裏會積累汙染物，柱效下降，分析時可能出現異常峰或基線波動。另外，柱溫波動也有影響，溫度變化會改變組分在固定相和流動相中的分配，影響保留時間，進而導致基線漂移。​

保養色譜柱，要定期衝洗或再生，具體方法參考色譜柱說明書，按步驟去除汙染物。同時，用柱溫箱穩定柱溫，減少溫度波動，這樣基線能穩定不少。​

5. 環境幹擾​

外界環境的幹擾也不能忽視。實驗室電壓不穩，檢測器供電受影響，信號會波動，基線噪聲增大。周圍的電磁幹擾也頭疼，像離心機、空調這些設備運行時產生的電磁信號，可能幹擾檢測器，讓基線不穩。​

應對環境幹擾，首先給儀器接穩壓電源，保證供電穩定。其次，放置儀器時遠離電磁幹擾源，同時做好儀器接地，減少電磁幹擾的影響。​

三、日常維護建議（預防措施）​

做好日常維護，能大大減少基線不穩的問題。​

流動相管理上，堅持用 HPLC 級溶劑，避免因純度問題引入幹擾。每次使用前，脫氣處理要到位，不管是超聲還是在線脫氣，都要保證效果。​

檢測器維護很關鍵，記錄好氘燈使用時間，快到使用壽命時提前準備更換，別等能量不足影響實驗。流通池也要定期清洗，保持潔淨，確保檢測信號準確。​

係統穩定性檢查不能少，定期校準泵的流速，保證流動相輸送穩定。經常檢查管路是否漏液，發現問題及時處理，避免影響係統壓力和流速。​

色譜柱保養也重要，使用保護柱能減少汙染物進入分析柱，延長其使用壽命。色譜柱長期不用時，用純有機相妥善保存，防止填料變質。​