一、 目的

規範高效小黄鸭官网下载的操作、使用和維護，確保分析結果的準確性、重現性和儀器安全穩定運行，延長儀器使用壽命。

二、 適用範圍

適用於所有使用本實驗室高效小黄鸭官网下载進行分析檢測的人員。

三、 安全注意事項

個人防護：操作時必須穿戴實驗服、手套和防護眼鏡。

溶劑安全：

了解所用流動相（甲醇、乙腈、緩衝鹽等）的毒性和易燃性，在通風櫥內進行操作。

廢棄流動相和樣品需按規定分類收集，妥善處理。

壓力安全：

係統高壓力不得超過泵和色譜柱的耐壓極限。

在開啟泵前，確保流路暢通，排空閥已擰緊，避免壓力急劇升高。

用電安全：儀器應接地良好，防止溶劑泄漏到電路部分。

色譜柱保護：使用符合要求的流動相和樣品，防止色譜柱堵塞或化學損壞。

四、 關鍵注意事項

流動相“三必須”：

必須使用色譜純溶劑和超純水。

必須經過 0.45 µm或0.22 µm濾膜過濾。

必須進行超聲脫氣，防止氣泡進入係統。

緩衝鹽“三忌”：

忌存不衝：實驗結束必須用高比例水相（≥10%）衝洗≥30分鍾，徹底置換鹽分，再轉換到有機相保存。

忌現配不用：必須現用現配，防止長菌變質。

忌沉澱：嚴禁將高濃度緩衝鹽與高比例有機相直接混合，防止結晶析出。

色譜柱“三核心”：

方向：確保流動相流向與柱體箭頭方向一致，嚴禁反接。

保存：長期不用時，必須用純有機相（如甲醇、乙腈）衝洗並保存在其中。

兼容：確保流動相pH值、溶劑與色譜柱固定相兼容，不超出使用範圍。

樣品“兩匹配”：

樣品溶劑強度應與初始流動相匹配或更弱，以防峰形畸變。

樣品必須清澈透明，建議過濾後進樣。

關機“一絕對”：

絕對禁止在含緩衝鹽的流動相中直接關機，必須執行“水相過渡”衝洗流程。

五、 操作流程

（一） 開機前準備

環境檢查：檢查實驗室溫度（一般15-30℃）和濕度是否穩定。

流動相準備：過濾、脫氣。緩衝鹽現用現配。

樣品準備：完全溶解，並用與流動相初始組成相近的溶劑稀釋、過膜。

儀器檢查：檢查廢液瓶容量、管路漏液和色譜柱連接。

（二） 開機與係統初始化

依次打開穩壓電源、電腦、檢測器、自動進樣器、柱溫箱，後打開輸液泵。

啟動工作站，等待係統自檢就緒。

（三） 方法編輯與參數設置

在工作站中設置：

泵：流動相比例、流速、壓力上下限。

檢測器：檢測波長、采樣頻率。

柱溫箱：溫度。

自動進樣器：進樣體積、洗針程序。

運行時間。

（四） 係統平衡

Purge：打開排空閥，對各通道進行Purge，排除氣泡後擰緊排空閥。

平衡：以方法初始條件運行，直至基線平穩、壓力穩定。

（五） 樣品分析

放置樣品，編輯序列。

保存並運行序列，實時監控基線和壓力。

（六） 數據處理與報告

進行積分、校準、計算並生成報告。

（七） 關機

衝洗：

若有緩衝鹽：先用超純水衝洗≥30分鍾，再用甲醇/乙腈衝洗≥30分鍾。

若無緩衝鹽：直接用甲醇/乙腈衝洗≥15分鍾。

停機：流速降為0，在軟件中關閉各模塊，依次關閉硬件電源。

登記：填寫儀器使用記錄。

六、 日常維護

泵：定期檢查並更換泵密封圈。

進樣器：定期清洗或更換進樣針、轉子密封墊。

檢測器：定期更換氘燈。

色譜柱：充分衝洗後妥善保存。

七、 常見問題與排查

問1：係統壓力異常偏高可能是什麽原因？如何處理？

答：常見原因是堵塞。

處理：首先排查並更換或清洗保護柱。若無效，可能色譜柱或在線過濾器堵塞，需進行反衝（若允許）或更換。若使用了緩衝鹽，考慮是否為鹽析，用高比例水相低速衝洗。

問2：係統壓力過低或劇烈波動怎麽辦？

答：通常由氣泡或漏液引起。

處理：首先對所有流動相通道進行充分Purge排氣。若壓力仍不穩定，仔細檢查所有管路接頭（特別是泵頭和進樣器）是否有漏液，並擰緊或更換部件。

問3：基線噪音很大可能是什麽問題？

答：可能原因有三類。

處理：

檢查氘燈：若使用時間超過2000小時，考慮更換。

檢查流動相：重新配製新鮮流動相並脫氣。

檢查氣泡：通過Purge和提高流速衝走檢測器中的氣泡。

問4：色譜峰出現拖尾或分叉如何排查？

答：主要與色譜柱和樣品有關。

處理：

檢查色譜柱：使用柱效測試標準品判斷柱效是否下降，必要時衝洗再生或更換色譜柱。

檢查樣品溶劑：確保樣品溶劑強度不高於初始流動相。

檢查連接：確認色譜柱兩端管路連接緊密，無死體積。

問5：分析過程中出現“鬼峰”怎麽辦？

答：鬼峰通常來自汙染。

處理：

進行空白運行：不進樣采集數據，若仍有鬼峰，則汙染來自係統或流動相。

清洗係統：用強溶劑衝洗整個流路。

更換流動相：使用新鮮配製的流動相。

加強洗針：增加自動進樣器的洗針次數和強度，防止交叉汙染。