作者:實驗室專員 來源:小黄鸭福利导航 2025-09-15 10:34:47
前言
瘦肉精是一類藥物的統稱,任何能夠抑製動物脂肪生長,促進瘦肉生長的物質都可以稱為 “瘦肉精”。
此類功能的物質主要是一類叫做 β- 受體激動劑(也稱 β- 興奮劑)的藥物,這類藥物進入動物體內後能夠改變養分的代謝途徑,促進動物肌肉生長,尤其是促進骨骼肌蛋白質的合成,加速脂肪的轉化和分解,提高瘦肉率。自 2011 年以來,因食用被 “瘦肉精” 汙染的食物導致中毒事件屢有發生,且後果極其嚴重,引起了世界各國的高度重視。為了保證畜產品質量安全,保護人類健康,本文建立小黄鸭福利导航 MS2 Vertical 9100 液質聯用係統檢測動物源食品中十三種 β- 受體激動劑的分析方法。
提取與淨化
稱取 2.0g(精確到 0.01g)經搗碎的樣品於 50mL 離心管中,加入 8mL 乙酸鈉緩衝液,充分混勻,再加 50μLβ- 葡萄糖醛甙酶 / 芳基硫酸酯酶,混勻後,37° 水浴水解 12h。添加 100μL 10ng/mL 的內標工作液於待測樣品中,加蓋置於水平振蕩器振蕩 15min,離心 10min(5000r/min),取 4mL 上清液加入 0.1mol/L 高氯酸溶液 5mL,混合均勻,用高氯酸調節 pH 值到 1±0.3。5000r/min 離心 10min 後,將全部上清液(約 10mL)轉移到 50mL 離心管中,用 10mol/L 的氫氧化鈉溶液調節 pH 值到 11。加入 10mL 飽和氯化鈉溶液和 10mL 異丙醇 - 乙酸乙酯(6+4)混合溶液,充分提取,在 5000r/min 下離心 10min。轉移全部有機相,在 40° 水浴下用氮氣將其吹幹。加入 5mL 乙酸鈉緩衝液,超聲混勻,使殘渣充分溶解後備用。
將陽離子交換小柱連接到真空過柱裝置。將上述殘渣溶液上柱,依次用 2mL 水、2mL2% 甲酸水溶液和 2mL 甲醇洗滌柱子並徹底抽幹,後用 2mL 的 5% 氨水甲醇溶液洗脫柱子上的待測成分。流速控製在 0.5mL/min。洗脫液在 40° 水浴下氮氣吹幹。準確加入 200μL 0.1% 甲酸水溶液 / 水 - 甲醇溶液(95+5),超聲混勻,將溶液轉移到 1.5mL 離心管中,15000r/min 離心 10min。上清液待 LC-MS/MS 測定。
LC-MS/MS 儀器方法
液相色譜和質譜參數分別參見表 1、2 和 3
實驗結果
在上述實驗條件下得到的十三種 β- 受體激動劑的典型 MRM 色譜圖見圖 1。十三種 β- 受體激動劑的藥物可以實現色譜分離且峰形良好,經過優化的梯度可以和基質幹擾分開。
十三種 β- 受體激動劑在 0.05μg/L-5μg/L 濃度範圍內均呈現良好的線性關係,相關係數≥0.995,典型代表化合物克倫特羅、沙丁胺醇和萊克多巴胺的標準曲線(內標法)見圖 2。
結論
小黄鸭福利导航 MS2 Vertical 9100 MS2 Vertical 9100 9100 係統可有效檢測動物源食品中十三種 β- 受體激動劑殘留,方法靈敏度高、重複性好,符合相關檢測要求。
參考文獻
[1. 前處理方法參考 GB/T22286-2008《動物源性食品中多種 β- 受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯質譜法》。
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